水产疫苗的种类
近年来,随着分子生物学、基因工程等学科的发展和国家科技投入的增加,我国水产疫苗研究掀开了崭新的一页,迈出了新的步伐。据统计,全国现有近30家科研单位开展水产疫苗相关研究,涉及包括病毒、细菌和寄生虫等病原27种(类)。到目前为止,有4个疫苗获得国家新兽药证书,分别为草鱼出血病细胞灭活疫苗、鱼用嗜水气单胞菌灭活疫苗和牙鲆溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病多联抗独特型抗体疫苗以及草鱼出血病活疫苗;年初草鱼出血病活疫苗生产使用的批准(农业部公告号)正式开启了我国水产疫苗产业化进程。水产疫苗按抗病原的种类可分为细菌疫苗、病毒疫苗和寄生虫疫苗;按组成成分可分为单价疫苗、多价疫苗和混合疫苗(多联疫苗);按疫苗制备方式可分为活疫苗、灭活疫苗(包含土法疫苗)、亚单位疫苗及生物技术疫苗等。1活疫苗在兽医临床中有强毒苗、弱毒苗和异源苗3种,目前水产活疫苗中应用较多的是用致病性已大为减弱的病毒减毒株或变异的弱毒株制备的疫苗,称为弱毒疫苗,包括VHSV的F25(21)抗热株苗、CCV减毒疫苗、疖疮减毒疫苗、IHNV减毒疫苗和草鱼出血症细胞培养的弱毒疫苗。弱毒疫苗接种后接近于自然感染,能够有效激发鱼体细胞免疫,并能在体内繁殖,因而疫苗用量少,免疫持续时间较长,且不必添加佐剂。但其不足之处主要是活疫苗在自然条件下安全性差,可能会导致病毒的转变而在生态环境中失去控制;同时,活疫苗贮存运输不方便,且保存期短。2灭活疫苗灭活疫苗是经理化方法将病原微生物灭活,但其仍保持免疫原性,接种后使水生动物产生特异性抵抗力的疫苗。灭活疫苗研制周期短,使用安全,易于保存,但其接种后不能在体内繁殖,因此需要接种剂量较大,免疫持续时间短,且需要加入适当的佐剂以增强免疫效果。此类疫苗包含多种组织浆灭活疫苗、弧菌灭活苗、嗜水气单胞菌疫苗、链球菌疫苗,以及欧美国家鲑鳟鱼养殖中常用的冷水病疫苗、VHS疫苗、PHV疫苗等。3亚单位疫苗亚单位疫苗是去除病原体中与激发机体保护性免疫无关甚至有害的成分,但保留有效免疫原成分制作的疫苗。亚单位疫苗较全病毒疫苗除去了产生不良反应的物质,副作用减少。目前,水产上研究较多的是建立在细菌外膜蛋白、脂多糖等保护性抗原免疫原性成分基础上的亚单位疫苗制备,但大部分还在试验阶段,没有商业化生产。如利用细胞肿大虹彩病毒(Redseabreamiridovirus,RSIV)衣壳蛋白R基因转化大肠杆菌,经灭活处理后注射真鲷可对RSIV感染产生很好的免疫保护作用。亚单位疫苗以直接被合成或通过重组DNA技术生产,不含有病原的毒力因子,并且由基因工程菌表达,安全性好,生产简单易控;使用时通常需添加佐剂,或与载体偶联,以增强其免疫保护性。4基因工程疫苗基因工程疫苗指应用重组DNA技术,将病原的保护性抗原基因在细菌、酵母或细胞等基因表达系统中体外表达,生产能诱导机体产生保护性免疫反应的病原蛋白质,再经过分离纯化而制备的疫苗。应用基因工程技术能制备不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的减毒疫苗以及多价疫苗,其兼具亚单位疫苗的安全性和活疫苗的免疫效力。目前,水产养殖上在研究应用的基因工程疫苗有IHNV、IPNV、FRV、鳗鱼病毒和文蛤病毒等疫苗,其中传染性胰脏坏死病毒(infectiouspancreaticnecrosisvirus,IPNV)VP2重组亚单位疫苗是目前唯一商品化的鱼用重组蛋白疫苗。5DNA疫苗DNA疫苗是将编码某种蛋白质抗原的重组真核表达载体直接注射到动物体内,被宿主细胞摄取后并转录和翻译表达抗原蛋白,诱导机体产生非特异性和特异性免疫应答,从而起到免疫保护作用。DNA疫苗有别于其他疫苗之处在于它利用载体持续表达抗原,而不是直接使用抗原。与传统疫苗相比,DNA疫苗具有可诱导更全面的免疫反应、稳定性更高、生产成本低、易于大规模生产等优点,且既具有减毒疫苗的优点,又无返毒的危险,被看作是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗,已成为水产疫苗研究和开发的热点。有关水产DNA疫苗的研究,最早见于年的实验研究。虽然DNA疫苗的研究工作起步较晚,但已取得了令人鼓舞的成就。目前DNA疫苗主要集中在鲑鳟鱼类IHNV、VHSV、杆状病毒(SVCV)、鲤春病毒(SHRV)等传染性病毒病的防治上,而挪威已批准使用一种可注射的、用病毒蛋白VP3制作的抗IPN疫苗。
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